T4 DNA Ligase

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CL301-01 T4 DNA Ligase 500U 320 微信电话:15810761375
CL301-02 500U×10 3000


浓 度:5U/μl

产品概述:

在有Mg2+和ATP存在的条件下,T4 DNA Ligase能催化双链DNA或RNA上相邻的5´-磷酸末端和3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化双链DNA的平末端或粘性末端之间的连接,还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切刻,但不能催化单链DNA之间的连接。

保存条件:-20℃保存,有效期一年。

酶储存缓冲液:

10 mM Tris-HCl (pH 7.5),50mM KCl,1mM DTT,0.1mM EDTA,50% (v/v) glycerol。

5 × T4 DNA Ligase Buffer

250 mMTris-HCl (pH 7.5),50mM MgCl2,50mM DTT,5mM ATP,连接促进剂。

来 源:纯化于携带T4 DNA ligase基因的E. coli菌株。

抑制剂和热失活:

大于200mM的NaCl或KCl可以强烈抑制连接酶活性。65℃加热10分钟或70℃加热5分钟即可失活。

单位定义:

在37℃,20分钟内交换1 nmole的32PPi所需要的酶量定义为一个Weiss单位。本产品酶1U(Weiss Unit)相当于200个粘性末端单位。在T4 DNA连接酶反应缓冲液中,16℃条件下,30分钟能够使50%的经HindIII消化的λDNA片段连接所需要的酶量为一个粘性末端单位。

质量控制:

蓝白斑分析实验表明白斑数小于2%;过量T4 DNA Ligase混合超螺旋质粒检测实验表明无核酸酶检出;SDS-PAGE检测重组蛋白纯度大于99%。

(具体操作详见说明书)


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