TG1感受态细胞

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BC120-01 TG1感受态细胞 10×100μl 240 微信电话:15810761375
BC120-02 20×100μl 420


储存条件:-70℃保存,避免反复冻融。不适合在液氮中保存。


产品介绍:

TG1菌株来源于大肠杆菌K-12,主要用于噬菌体展示(Phage Display),也可进行M13噬菌体相关的实验,也可用于普通质粒的克隆构建及提取。lacZΔM15的存在可进行α互补原理上的蓝白斑筛选实验。由于该菌株不含核酸酶endA1突变,提取的质粒中核酸酶含量较高,需用去蛋白液处理。TG1感受态细胞由特殊工艺制成,经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg DNA。


基因型:supE thi-1 _(lac-proAB) _(mcrB-hsdSM)5(rK– mK–) [F´ traD36 proAB lacIqZ _M15]


菌株抗性:对氨苄青霉素、卡那霉素、壮观霉素、博莱霉素、庆大霉素、氯霉素和四环素敏感。


质粒转化步骤:(以氨苄青霉素抗性的pUC19质粒为例)

1.将感受态细胞置于冰水浴中化冻。待细胞刚化冻后,加入1-5μl含有1-100ng的质粒DNA到细胞中,用手指拨打管底,轻轻混匀。


2.冰水浴中放置30分钟,不要晃动。


3.42℃热击60秒钟,不要晃动。


4.冰水浴中放置2分钟,不要晃动。


5.加入500μl的室温的SOC或LB培养基。


6.置于37℃摇床中,150-200rpm,复苏培养60分钟。


7.取50-100μl菌液涂布在含有氨苄青霉素抗性的LB平板上。待液体吸干后,倒置平板37℃培养12-24小时。


(平板划线分离法:复苏培养结束后,12000rpm离心30秒钟,弃掉上清,留100μl左右的液体,用200μl吸头轻轻吹打散菌块,取10μl重悬的菌液分多点滴在平板上,倾斜吸头,用吸头头部的侧面将滴在平板上的液体来回划线。这个方法可以获得更大的单克隆菌落。)


(具体详见说明书)

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